O principal objetivo deste estudo foi comprovar que nada melhor que um meio de cultura produzidos a partir do sangue de indivíduos da própria ordem dos Testudines para observações da microbiota destes. Uma vez que é normal utilizar sempre meios produzidos a partir de sangue de carneiro para a observação de comportamentos hemolíticos de microrganismos na maioria das espécies de animais.
Os meios de cultura permitem o cultivo de microrganismos fora de seu “habitat” natural, cada tipo de microrganismo tem exigências físicas e nutritivas muito diferentes.
Para verificar a atividade hemolítica de algumas bactérias, como as do gênero Streptococcus, é necessário utilizar um meio de cultura Ágar-sangue.
As bactérias deste gênero são cocos gram positivos, normalmente em forma de cacho de uva e se apresentam imóveis e não esporulam. São Bactérias facultativas, crescem na presença ou não de O2.
Streptococcus pneumoniae (principal causador da pneumonia) e o Streptococcus pyogenes (causador da Síndrome do Choque Tóxico Estafilocócico), são espécies de grande importância por serem causadoras de patologias recorrentes principalmente em humanos. Por fazerem parte da microbiota normal de Testudines, são estas duas espécies que serão abordadas aqui.
Trachemys adiutrix é uma espécie semi-aquática e endêmica do Estado do Maranhão, vem-se buscando cada vez mais estudos desta espécie devido sua grande endemicidade, sua grande resistência a ambientes desérticos e seu valor econômico por atrair turistas. Não se tem até hoje na literatura cientifica qualquer estudo sobre o comportamento hemolítico de bactérias em qualquer meio de cultura produzido através do sangue desta espécie.
Tem-se como objetivo no artigo consultado, objetivo comparar o comportamento hemolítico de S. pneumoniae e S. pyogenes, em meio de cultura produzido com sangue de tartaruga de água-doce.
Para a confecção de meios de cultura produzidos a partir do sangue desta espécie, são seguidos os seguintes passos: é feita a punção sanguínea de indivíduos da espécie, e o produto retirado é colocado em um erlenmeyer contendo pérolas de vidro para acontecer a desfibrinação, em seguida coloca-se 50 microlitros de sangue desfibrinado para uma Placa de Petri estéril e, em seguida, adicionado 10 ml da base de ágar-sangue à temperatura aproximada de 50ºC, homogeneizando-se com movimentos circulares e deixando-se resfriar a temperatura ambiente.
Resultados importantes são obtidos quando comparado ação destas bactérias em placas de Petri produzidas com sangue de carneiro e de tartaruga.
Começando pela coloração, placas de continham meio de cultivo produzido do sangue de tartaruga eram mais claras que as placas que tinham como base o sangue do carneiro. Isso porque as hemácias de répteis são nucleadas, diferente das dos mamíferos. A presença de um núcleo centralizado diminui a quantidade de hemoglobina dissolvida no citoplasma celular, conferindo uma cor mais clara ao meio.
Com relação aos padrões hemolíticos, estes foram igual em ambas as Placas de Petri, não importando a origem do sangue, sugerindo que as Pneumolisinas e Estreptolisinas atuam com a mesma intensidade tanto nas hemácias de mamíferos quanto nas dos quelônios. Estas hemolisinas têm efeito biológico de lise dos eritrócitos (hemácias) e plaquetas.
Uma vantagem é obtida com o cultivo destes microrganismos nas pacas produzidas com sangue de quelônios. Para os meios fabricados com sangue de carneiro, o tempo médio de florescimento à 38º é de 24 horas. Para as placas das tartarugas, o florescimento das colônias bacterianas ocorreu cerca de 6 horas depois da semeadura à 38º. O meio fabricado a partir do sangue da tartaruga possui algum fator diferencial e estimulador ao crescimento dos microorganismos em questão, ainda não identificado.
Estes Streptococcus fazem parte da microbiota normal tanto do homem quanto dos quelônios, levando ao aparecimento de uma patologia devido ao desequilibro de populações da microbiota. Apesar de não existirem relatos da patogenicidade da bactéria S.pyogenes em Testudines.
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